Кальцеин AM представляет собой кальцеин (кальцеин ацетоксиметиловый эфир), в который введена ацетоксиметиловая (AM) группа. Это не только маскирует участок молекулы кальцеина, отвечающий за хелатирование кальция, но и повышает его гидрофобность, благодаря чему кальцеин AM легко проникает через мембрану живых клеток и расщепляется эндогенными клеточными эстеразами с образованием кальцеина. Кальцеин, утративший AM-группу, не может легко проходить через клеточную мембрану и поэтому удерживается внутри клетки; кроме того, частично открывается участок молекулы, связывающий кальций, что позволяет зонду кальцеина связываться с ионами кальция в живой клетке и излучать яркую зеленую флуоресценцию. Однако мертвые клетки не содержат эстераз и не могут гидролизовать кальцеин AM, поэтому он не метит мертвые клетки. Кальцеин AM обладает низкой цитотоксичностью и оказывает незначительное влияние на клеточные функции, такие как пролиферация клеток или хемотаксис лимфоцитов, что делает его отличным флуоресцентным зондом для окрашивания живых клеток.
О наборе
Данный набор, набор для оценки клеточной активности с использованием кальцеина AM (Calcein AM Cell Activity Assay Kit), также известный как набор для флуоресцентного подсчета клеток (CCK-F), предназначен для оценки активности, токсичности и пролиферации клеток путем мечения живых клеток флуоресцентным зондом кальцеином AM. Набор был оптимизирован и настроен, что обеспечивает не только высокую чувствительность обнаружения и широкий линейный диапазон, но и требует лишь короткого времени инкубации для завершения анализа клеток. Он прост в использовании, не требует применения радиоизотопной метки или таких этапов, как кристаллизация и растворение, что позволяет снизить погрешности, связанные с экспериментальными процедурами, и повысить точность и воспроизводимость результатов.
Транспортировка с хладоэлементами (влажный лед); хранить при температуре -20°C в защищенном от света месте; по возможности избегать повторных замораживаний и оттаиваний. Срок годности — 12 месяцев.
Состав набора
| Номер компонента | Компонент | G1609-100T | G1609-500T |
|---|---|---|---|
| G1609-1 | Раствор кальцеина AM (Calcein AM Solution) | 100 мкл | 500 мкл |
| G1609-2 | Аналитический буфер CCK-F (CCK-F Assay Buffer) | 10 мл | 50 мл |