войти
Набор для определения клеточной пролиферации и цитотоксичности MTT
Описание
МТТ также называется 3-(4,5-диметил-2-тиазолил)-2,5-дифенил-2Н-тетразолия бромид (тиазолиловый синий тетразолия бромид). Его молекулярная формула — C₁₈H₁₆BrN₅S, молекулярная масса — 414,32.
МТТ обычно используется для определения цитотоксичности и клеточной пролиферации. Принцип метода заключается в том, что фермент сукцинатдегидрогеназа в митохондриях живых клеток способен восстанавливать экзогенный МТТ в нерастворимый в воде сине-фиолетовый кристаллический формазан, который накапливается внутри клеток, в то время как мертвые клетки не способны к такой реакции. Диметилсульфоксид (ДМСО) может растворять формазан, находящийся внутри клеток, и значение его светопоглощения измеряется с помощью планшетного спектрофотометра (ридера). Количество образующегося кристаллического формазана МТТ пропорционально количеству клеток в определенном диапазоне.
В традиционном МТТ-анализе, поскольку образующийся формазан нерастворим в воде, необходимо удалить верхний слой реакционного раствора, содержащего субстрат МТТ, а затем добавить ДМСО для растворения формазана, что может привести к плохой воспроизводимости и повторяемости эксперимента. Данный набор предоставляет специальный растворитель формазана. При проведении анализа нет необходимости удалять исходный реакционный раствор, содержащий МТТ-субстрат; можно непосредственно добавить растворитель формазана, который растворяет формазан, тем самым избегая ошибок, вызванных удалением исходного реакционного раствора.
Транспортировка с хладоэлементами (влажным льдом); раствор МТТ хранить при -20°C, защищать от света; растворитель формазана хранить при 4°C, защищать от света. Срок годности — 12 месяцев.