T4 ДНК-лигаза катализирует образование фосфодиэфирной связи между расположенными рядом 5'-фосфатной и 3'-гидроксильной группами в двухцепочечной ДНК или РНК. Этот фермент соединяет фрагменты с тупыми и липкими концами, а также восстанавливает одноцепочечные разрывы (ники) в двухцепочечной ДНК и некоторых гибридах ДНК/РНК.
Определение единицы активности: одна единица Вайсса (Weiss unit) катализирует превращение 1 нмоль [³²РРi] в АТФ за 20 минут при 37°С. Одна единица Вайсса эквивалентна приблизительно 200 единицам лигирования липких концов (CEU).
Буфер для хранения T4 ДНК-лигазы:
20 мM Tris-HCl (pH 7,5), 50 мM KCl, 1 мM DTT, 50% (об./об.) глицерин.
5× буфер для T4 ДНК-лигазы:
250 мM Tris-HCl (pH 7,6), 50 мM MgCl₂, 5 мM АТФ, 5 мM DTT, усилитель (Enhancer).
Транспортировка с хладоэлементами (влажный лед). Хранить при температуре -20°C. Срок годности — 12 месяцев.