войти
Раствор для извлечения пепсинового антигена (готовый)
Описание
После фиксации клеток или тканей параформальдегидом, формалином или другими альдегидными реагентами, вследствие образования альдегидных и карбоксиметильных связей с антигенными детерминантами, а также сшивания белков и других процессов, происходит изменение пространственной структуры белков. В результате антигенные детерминанты блокируются, а количество точек связывания между антигенами и антителами уменьшается, что в конечном итоге приводит к относительному ослаблению положительной частоты детекции и интенсивности окрашивания антигенов при иммунной метке, проявляясь как ложноотрицательные результаты или низкая положительная частота.
Белковая сшивка, вызванная альдегидами, обратима. При определенных условиях, таких как высокая температура или гидролиз протеазами, исходная конформация белка может быть восстановлена. Этот процесс называется демаскировкой антигена (антигенной ретривацией). Демаскировка антигена является ключевым этапом в процессе иммуногистохимии. Существует множество методов демаскировки антигена, и различные методы могут быть выбраны в зависимости от характеристик типа ткани. Некоторые подходят для термической демаскировки, а некоторые — для ферментативной. До появления индуцированной теплом демаскировки антигена, наиболее часто используемым методом была ферментативная демаскировка антигенных эпитопов с помощью трипсина, протеиназы K, пепсина и других ферментов.
Данный продукт представляет собой раствор для демаскировки антигена на основе пепсина. Концентрация пепсина составляет 0,4%, растворителем является разбавленная соляная кислота. Раствор имеет кислую реакцию. Может использоваться для демаскировки межуточных антигенов.
Хранение
Условия хранения: 4°C (при длительном хранении — при -20°C)
Условия транспортировки: с хладоэлементами (влажным льдом)
Срок годности: 12 месяцев с даты производства
Применение:
На этапе демаскировки антигена в ходе иммуногистохимического или иммунофлуоресцентного эксперимента, капли раствора пепсина для демаскировки антигена наносят непосредственно на тканевой срез, чтобы покрыть ткань, или срезы погружают в раствор для демаскировки и инкубируют при 37°C в течение 10–30 минут. Конкретное время зависит от типа среза и эффективности демаскировки.